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注意事項(xiàng):抗血清制備有必要留心的問題
更新時(shí)間:2020-03-04   點(diǎn)擊次數(shù):1356次

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血清其留心事項(xiàng)有如下幾點(diǎn): 

1、動物的免疫:反響存在著個(gè)體差異,乃至有人報(bào)告不同品種動物一次免疫后發(fā)作的抗體的不同可高達(dá)500倍,所以制備抗血清時(shí)不能只免疫一只動物,一般免疫3~4只,由于有的動物或許發(fā)作抗體效價(jià)很低或不發(fā)作抗體,免疫反響好的動物所能供給的抗體往往高于一般動物3~4倍。

2、制成的抗原乳劑是否為油包水乳劑應(yīng)進(jìn)行檢查,否則會影響免疫作用,如不是油包水乳劑,應(yīng)重新制備。

3、要制備價(jià)的抗體,有必要要加佐劑,加佐劑后免疫動物,抗體效價(jià)至少可增加5倍。但也應(yīng)考慮到,假設(shè)抗原中有微量的雜蛋白存在,即便0.005mg,亦可因有佐劑而發(fā)作非特異性的抗體,所以要根據(jù)試驗(yàn)需要和抗原的純度適當(dāng)?shù)剡\(yùn)用佐劑。

4、分裝保存的抗血清應(yīng)注明抗血清的稱謂,效價(jià),制備日期以及包裝量。

5、當(dāng)抗原量過少不易提純時(shí),可選用抗原抗體在瓊脂渙散中構(gòu)成的堆積線直接免疫動物制備抗體。

6、抗血清效價(jià)一般以抗血清稀釋倍數(shù)標(biāo)明。血清效價(jià)的檢測辦法許多,靈敏度各不同,因而在標(biāo)明抗血清效價(jià)時(shí),應(yīng)標(biāo)明檢測辦法。其他,在堆積反響中,呈現(xiàn)堆積時(shí)的抗原、抗體比例有一較大的規(guī)劃,如用不同濃度的抗原測定效價(jià)時(shí),成果會因而有別,所以在測定抗血清效價(jià)時(shí),需留心抗原的濃度。

7、為制備單價(jià)特異性高的抗血清,所用抗原純度越高越好,因而,在純化抗原過程中應(yīng)盡量除去或許存在的雜蛋白,這樣可以省去許多時(shí)刻來吸收抗血清中的非特異性抗體。 

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